Odpornost Mycobacterium Tuberculosis na nukleinsko kislino in rifampicin
Ime izdelka
Komplet za odkrivanje odpornosti na nukleinsko kislino in rifampicin bakterije Mycobacterium Tuberculosis HWTS-RT074B (krivulja taljenja)
Potrdilo
CE
Epidemiologija
Mycobacterium tuberculosis, na kratko tuberkulozni bacil, TB, je patogena bakterija, ki povzroča tuberkulozo. Trenutno so med najpogosteje uporabljena protituberkulozna zdravila prve izbire izoniazid, rifampicin in heksambutol itd. Protituberkulozna zdravila druge izbire vključujejo fluorokinolone, amikacin in kanamicin itd. Novo razvita zdravila so linezolid, bedakilin in delamani itd. Vendar pa zaradi nepravilne uporabe protituberkuloznih zdravil in značilnosti strukture celične stene Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis razvije odpornost na protituberkulozna zdravila, kar predstavlja resne izzive za preprečevanje in zdravljenje tuberkuloze.
Rifampicin se pogosto uporablja pri zdravljenju bolnikov s pljučno tuberkulozo že od poznih sedemdesetih let prejšnjega stoletja in ima pomemben učinek. Je prva izbira za skrajšanje kemoterapije pri bolnikih s pljučno tuberkulozo. Odpornost na rifampicin je predvsem posledica mutacije gena rpoB. Čeprav se nenehno pojavljajo nova zdravila proti tuberkulozi in se klinična učinkovitost bolnikov s pljučno tuberkulozo še naprej izboljšuje, še vedno primanjkuje zdravil proti tuberkulozi, pojav neracionalne uporabe zdravil v klinični praksi pa je relativno visok. Očitno bakterije Mycobacterium tuberculosis pri bolnikih s pljučno tuberkulozo ni mogoče pravočasno popolnoma uničiti, kar sčasoma vodi do različnih stopenj odpornosti na zdravila v bolnikovem telesu, podaljša potek bolezni in poveča tveganje za smrt bolnika.
Kanal
Kanal | Kanali in fluorofori | Reakcijski pufer A | Reakcijski pufer B | Reakcijski pufer C |
Kanal FAM | Poročevalec: FAM, Gasilec: Brez | rpoB 507–514 | rpoB 513–520 | 38KD in IS6110 |
Kanal CY5 | Poročevalec: CY5, Gasilec: Brez | rpoB 520–527 | rpoB 527–533 | / |
HEX (VIC) kanal | Poročevalec: HEX (VIC), Gasilec: Brez | Notranji nadzor | Notranji nadzor | Notranji nadzor |
Tehnični parametri
Shranjevanje | ≤-18℃ V temi |
Rok uporabnosti | 12 mesecev |
Vrsta vzorca | Sputum |
CV | ≤5,0 % |
LoD | Mycobacterium tuberculosis 50 bakterij/ml divji tip, odporen na rifampicin: 2x103bakterije/ml homozigotni mutant: 2x103bakterije/ml |
Specifičnost | Zazna divji tip Mycobacterium tuberculosis in mesta mutacij drugih genov za odpornost na zdravila, kot sta katG 315G>C\A, InhA-15C>T, rezultati testa pa ne kažejo odpornosti na rifampicin, kar pomeni, da ni navzkrižne reaktivnosti. |
Uporabni instrumenti: | Sistemi za PCR v realnem času SLAN-96P Sistem za PCR v realnem času BioRad CFX96 Sistem za PCR v realnem času LightCycler480® |
Delovni tok
Če za ekstrakcijo uporabljate komplet Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ki ga je mogoče uporabljati z avtomatskim ekstraktorjem nukleinskih kislin Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) ali kolono Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA (HWTS-3022-50) podjetja Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd., dodajte zaporedno 200 μL pozitivne kontrole, negativne kontrole in obdelanega vzorca sputuma ter ločeno dodajte 10 μL notranje kontrole v pozitivno kontrolo, negativno kontrolo in obdelan vzorec sputuma, nadaljnje korake pa je treba strogo izvesti v skladu z navodili za ekstrakcijo. Volumen ekstrahiranega vzorca je 200 μL, priporočeni volumen elucije pa je 100 μL.