Gen za odpornost na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Ime izdelka
Komplet za odkrivanje gena odpornosti na karbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (fluorescenčna PCR)
Epidemiologija
Karbapenemski antibiotiki so atipični β-laktamski antibiotiki z najširšim protibakterijskim spektrom in najmočnejšim protibakterijskim delovanjem.Zaradi svoje stabilnosti na β-laktamazo in nizke toksičnosti je postal eno najpomembnejših antibakterijskih zdravil za zdravljenje hudih bakterijskih okužb.Karbapenemi so zelo stabilni na plazmidno posredovane β-laktamaze razširjenega spektra (ESBL), kromosome in plazmidno posredovane cefalosporinaze (encimi AmpC).
Kanal
| PCR-mešanica 1 | PCR-mešanica 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Notranji nadzor | Notranji nadzor |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tehnični parametri
| Shranjevanje | ≤ -18 ℃ |
| Rok uporabnosti | 12 mesecev |
| Vrsta vzorca | Sputum, čiste kolonije, rektalni bris |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0 % |
| LoD | 103CFU/mL |
| Specifičnost | a) Komplet zaznava standardizirane negativne reference podjetja in rezultati ustrezajo zahtevam ustreznih referenc. b) Rezultati testa navzkrižne reaktivnosti kažejo, da ta komplet nima navzkrižne reakcije z drugimi respiratornimi patogeni, kot so Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratorni adenovirus, Enterococcus ali vzorci, ki vsebujejo druge gene, odporne na zdravila CTX, mecA, SME, SHV, TEM itd. c) Preprečevanje motenj: za test motenj so izbrani mucin, minociklin, gentamicin, klindamicin, imipenem, cefoperazon, meropenem, ciprofloksacin hidroklorid, levofloksacin, klavulanska kislina, roksitromicin in rezultati kažejo, da zgoraj omenjene moteče snovi nimajo moteče reakcije za odkrivanje genov za odpornost na karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM in IMP. |
| Uporabni instrumenti | Sistemi PCR v realnem času Applied Biosystems 7500 QuantStudio®5 sistemi PCR v realnem času SLAN-96P sistemi PCR v realnem času (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistem LightCycler®480 PCR v realnem času Sistem za odkrivanje PCR v realnem času LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouBioer tehnologija) MA-6000 Kvantitativni toplotni krožnik v realnem času (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 PCR sistem v realnem času BioRad CFX Opus 96 sistem PCR v realnem času |
Potek dela
Možnost 1.
Priporočeni reagent za ekstrakcijo: komplet za makro in mikro test splošne DNA/RNA (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ki se lahko uporablja s samodejnim ekstraktorjem nukleinskih kislin Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) podjetja Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Dodajte 200 μL običajne fiziološke raztopine oborina steljke.Nadaljnji koraki morajo slediti navodilom za ekstrakcijo, priporočeni volumen eluiranja pa je100μL.
Možnost 2.
Priporočeni ekstrakcijski reagent: reagent za ekstrakcijo ali čiščenje nukleinske kisline (YDP302) podjetja Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstrakcijo je treba začeti v strogem skladu z 2. korakom navodil za uporabo (dodajte 200 μL pufra GA oborini steljke , in stresajte, dokler steljka popolnoma ne visi).Za elucijo uporabite vodo brez RNaze/DNaze, priporočeni volumen elucije pa je 100 μL.
Možnost 3.
Priporočeni reagent za ekstrakcijo: reagent za sproščanje vzorca makro in mikro testa.Vzorec sputuma je treba sprati tako, da zgoraj omenjeni obdelani oborini steljke dodamo 1mL fiziološke raztopine, centrifugiramo pri 13000r/min 5 minut in supernatant zavržemo (ohranimo 10-20µL supernatanta).Za čiste kolonije in rektalne brise dodajte 50 μL reagenta za sproščanje vzorca neposredno v zgoraj omenjeno obdelano oborino steljke in v naslednjih korakih je treba ekstrahirati v skladu z navodili za uporabo.
